Jueves, 14 de Diciembre de 2017
    MICROSCOPÍA ÓPTICA Y CONFOCAL
 

Coordinador Científico:
Fco. Javier Díez-Guerra
Responsable Técnico:
Ángeles Muñoz

 

Microscopía Óptica y Confocal

 

SMOC

 

Comunidad de Madrid

 

ÚLTIMAS NOTICIAS

  • 07-12-2017: LSM510 Vertical reparado. Se ha cambiado el escáner X y el láser de Argón (línea 488).
  • 17-11-2017: Disponible de nuevo eescáner resonante del confocal Nikon A1R.
  • 16-11-2017: Apertura   confocal LSM800 a partir del lunes 20. Para realizar las reservas y organizar las sesiones de formación y asistencia, dirigirse al SMOC (lab 310).
  • 09-02-2017 Láser Maitai del Multifotón fuera de servicio. El equipo se puede utilizar como confocal.
 

ENLACES - REACTIVOS Y FLUORÓFOROS - ANTICUERPOS

 

 

INCUBACIÓN DE ANTICUERPOS CON POLVOS CETÓNICOS EN CASO DE QUE GENEREN MUCHO FONDO

  • PREPARACIÓN DE POLVOS CETÓNICOS
    • Se pueden preparar a partir de células (sólo si se puede disponer de un número elevado) o a partir de hígado o cerebro de rata, en general de tejidos.
    • Homogenizar el tejido en PBS (1 gr/ml) e incubarlo 5 minutos en hielo trabajando siempre en vidrio, nunca en plástico.
    • Añadir 8 ml de acetona a -20ºC por cada 2 ml de la suspensión y mezclar en vórtex.
    • Incubar en hielo desde 30 minutos hasta toda la noche agitando de vez en cuando en el vórtex.
    • Centrifugar a 10.000xg durante 10 minutos y descartar el sobrenandante.
    • Resuspender el sedimento con acetona a -20ºC y mezclar en vórtex.
    • Incubar 10 minutos en hielo.
    • Centrifugar a 10.000xg durante 10 minutos y descartar el sobrenadante.
    • Dejar secar el sedimento en un mortero a temperatura ambiente durante varias horas.
    • Disgregar con el mortero y guardar los polvos obtenidos a -20ºC.
  • PREABSORCIÓN DE ANTICUERPOS
    • Diluir el anticuerpo 1/25 con solución de bloqueo.
    • Añadir los polvos cetónicos a una concetración de 10 mg/ml.
    • Dejar 15 minutos a temperatura ambiente agitando de vez en cuando.
    • Centrifugar en minifuga 5 minutos a 4ºC,
    • Recoger el sobrenadante y añadir el mismo volumen de solución de bloqueo para que el anticuerpo quede a una dilución 1/50.
    • Centrifugar de nuevo en minifuga 5 minutos a 4ºC.